水稻蛋白二硫键异构酶基因沉默载体构建及其转基因后代的高温结实特性分析

作者：刘光快; 曹珍珍; 韦克苏; 潘刚; 苏达; 张春娇; 程方民

来源：作物学报, 2013, (05): 816-826.

• 水稻
• 蛋白二硫键异构酶
• 基因沉默
• RNAi载体构建
• 高温胁迫
• 结实特性 Rice (Oryza sativa L.)
• Protein disulfide isomerase (PDI)
• Gene silence
• RNA interference
• High temperature stress
• Seed setting characteristics

采用RT-PCR法亚克隆了PDI基因保守区内450bp的靶标序列作为干扰区段,构建了含有内含子hpRNA(ihpRNA)的双元表达载体pTCK303-RiOsPDI,经农杆菌介导转化日本晴,获得转基因植株;通过在T0代对其潮霉素(Hyg)抗性基因的PCR鉴定,确定携带有干扰片段的T-DNA区已整合到水稻基因组中,且在转基因T1代符合3∶1的分离模式。半定量PCR和荧光定量PCR的检测结果表明,PDI基因沉默转基因阳性植株不同器官中的PDI表达量均显著降低,尤其是其籽粒中表达量较微,几乎能引起靶基因80%左右沉默。对转基因T2代植株的高温结实特性和籽粒理化品质的检测结果,PDI基因沉默会引起高温...

• 单位
  浙江大学