插入失活法构建2型猪链球菌突变株

作者：路玲玲; 李蓉; 李文君; 袁媛; 郑玉玲; 王恒樑; 姜永强

来源：中国食品卫生杂志, 2008, (02): 103-107.

DOI：10.13590/j.cjfh.2008.02.022

• 链球菌
• 猪
• 基因沉默
• 诱变
• 插入 Streptococcus suis
• Gene Silencing
• Mutagenesis
• Insertional

目的构建2型猪链球菌突变株05ZYΔ0913,05ZYΔ0936。方法以05ZY为模版,分别扩增0913、0936基因内部504bp,549bp片段为同源臂,与pSET4S质粒进行连接,将连接产物转入DH5α感受态细胞中,构建载体0913-pSET4S,0936-pSET4S。然后利用插入失活法,将构建的0913-pSET4S、0936-pSET4S载体通过电转化导入2型猪链球菌的感受态细胞中,利用壮观霉素抗性筛选得到阳性转化子,并用PCR进行鉴定。结果筛选到的菌株均能抵抗100μg/ml壮观霉素,经PCR鉴定,为失活了目的片段(0913和0936片段)的2型猪链球菌突变株。结论本研究成功构建...

• 单位
  中国疾病预防控制中心营养与健康所; 军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室