摘要
【目的】探讨血小板O_2·~-和H_2O_2水平变化导致2型糖尿病患者血小板异常活化的分子机制。【方法】检测2型糖尿病患者和正常对照组的血小板4项临床参数;应用免疫荧光技术观察血小板形态结构的变化;应用流式细胞术测定两组血小板内线粒体O_2·~-、胞浆O_2·~-和H_2O_2水平;用NADH/PMS和H_2O_2分别处理正常对照组血小板,流式细胞术检测血小板的活化阳性百分率;应用Western Blot检测两组血小板内过氧化氢酶(Catalase)、超氧化物歧化酶2型(Mn-SOD)的表达差异。【结果】2型糖尿病组平均血小板体积(MPV)明显高于正常对照组(P<0.001),而血小板数量(PLT)、血小板分布宽度(PDW)、血小板比积(PCT)差异均无统计学意义;免疫荧光显示2型糖尿病组血小板形态结构较正常对照组发生改变,流式细胞术检测血小板的线粒体O_2·~-、H_2O_2水平明显高于正常对照组(P<0.05),而胞浆O_2·~-水平差异无统计学意义。通过流式分析H_2O_2和NADH/PMS体系明显促进血小板的活化(P<0.01)。Western Blot结果显示2型糖尿病组血小板Catalase的表达下调,而Mn-SOD的表达及活性无差异。【结论】糖尿病血小板内Catalase表达下调可能是导致线粒体O_2·~-、H_2O_2水平升高的原因,从而调控糖尿病血小板的异常活化。
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单位中山大学中山医学院; 生物化学教研室; 中山大学