摘要
[目的]为了探究根瘤菌Ⅲ型效应因子在大豆-根瘤菌共生体系形成过程中作用。[方法]通过三亲杂交的方法进行根瘤菌NopA突变体的构建,并利用PCR和qRT-PCR对突变体进行验证。在染料木苷诱导情况下,纯化根瘤菌胞外蛋白,利用Ⅲ型效应因子NopL及NopT的抗体对纯化蛋白进行检测。将野生型菌株HH103和NopA突变体共同接种大豆,测定NopA突变对根瘤菌结瘤能力的影响。[结果]根瘤菌效应因子NopA突变能够抑制NopL和NopT的分泌。结瘤能力鉴定表明,NopA突变能够显著降低东农50大豆植株根瘤数和根瘤干重,根瘤数由每株31.9下降到21.6,根瘤干重由每株33.9 mg下降到20.5 mg。共生结瘤Marker基因表达量分析表明,在根瘤菌侵染过程中,NopA能够促进GmPR1和PR5的表达。[结论]证明了根瘤菌Ⅲ型效应因子NopA能够影响其他Ⅲ型效应因子的分泌,并且能够正调控大豆-根瘤菌共生结瘤。
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