核受体相关蛋白1基因慢病毒载体的构建

作者：林海; 王向鹏; 王威; 徐蛟天; 陈孝祥; 宋晓斌; 杨智勇; 邓兴力^*

来源：昆明医科大学学报, 2018, 39(11): 1-5.

• 核受体相关蛋白1
• 慢病毒载体
• 帕金森病

目的构建使用绿色荧光蛋白(GFP)标记的核受体相关蛋白1 (nuclear receptor related 1 protein,Nurr1)慢病毒表达载体(DCE-Nurr1)并鉴定。方法使用引物设计软件Primier5设计基因Nurr1引物并采用聚合酶链反应(PCR)对其进行扩增,利用XbaI和Not I分别将基因Nurr1和载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP进行双酶切,利用T4链接酶将已酶切的基因Nurr1和已酶切的载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP连接起来,完成慢病毒表达载体的构建。结果通过PCR成功地扩增了Nurr1基因并连接到载体pCDHCMV-MCS-EF1-copGFP上,序列与GenBank登记的序列一致。结论成功构建DCE-Nurr1慢病毒表达载体,为进一步在体内或体外研究Nurr1基因功能及其对多巴胺神经元的保护作用提供了基础。

• 单位
  昆明医科大学第一附属医院; 武汉市普仁医院