脑血管内皮细胞Prmt5基因敲除导致小胶质细胞激活并影响血脑屏障完整性

作者：韩钰莹; 宁慧敏; 张一哲; 宋晓朋; 许成芳; 蔡云婷; 杨晓^*; 王俊^*

来源：中国生物工程杂志, 2023, 43(05): 1-10.

DOI：10.13523/j.cb.2212013

• 小胶质细胞
• 脑血管内皮细胞
• Prmt5
• 血脑屏障

目的：研究脑血管内皮细胞Prmt5基因敲除小鼠脑中小胶质细胞是否激活，及其对血脑屏障渗透性的影响。方法：通过免疫荧光和Western blot检测小鼠皮层、丘脑、小脑中小胶质细胞标志分子表达水平，探究脑血管内皮细胞Prmt5基因敲除小鼠脑中小胶质细胞是否激活，并通过实时定量PCR和Western blot检测不同脑区M1型(CD86、CD16、TNF-α)和M2型(Ym1、Arg1、IL-10)小胶质细胞标志物，考察激活小胶质细胞极化类型。利用集落刺激因子1受体(CSF1R)抑制剂PLX5622清除对照和Prmt5基因敲除小鼠脑中的小胶质细胞，通过实时定量PCR、免疫荧光检测小胶质细胞标志物表达水平，评价小胶质细胞耗竭效率；利用N-羟基磺酸基琥珀生物素(Sulfo-NHS-Biotin)染料灌注和示踪的方法评价耗竭小胶质细胞对脑血管内皮细胞Prmt5基因敲除小鼠血脑屏障完整性的影响。结果：脑血管内皮细胞Prmt5基因敲除导致小胶质细胞激活，小胶质细胞M1型标志物(CD16、CD86及TNF-α)及M2型标志物(Ym1、Arg1及IL-10)均表达上调。PLX5622处理导致小胶质细胞耗竭并加重Prmt5基因敲除小鼠BBB渗漏表型。结论：脑血管内皮细胞Prmt5基因敲除导致小胶质细胞激活，小胶质细胞参与保护脑血管内皮细胞Prmt5基因敲除导致的血脑屏障损伤。

• 单位
  青岛大学; 蛋白质组学国家重点实验室; 基础医学院