摘要

目的 探讨卵巢低反应女性中沉默信息调节因子1(SIRT1)对卵巢颗粒细胞的调控。方法 本研究纳入行IVF/ICSI-ET助孕的女性共60例,其中卵巢低反应(POR)组和卵巢正常反应(NOR)组各30例。采用密度梯度离心法分离纯化卵泡液中的颗粒细胞。分别使用SIRT1激动剂白藜芦醇(RESV)或抑制剂EX527处理POR组颗粒细胞,对照组为不使用药物处理的颗粒细胞。采用qPCR检测颗粒细胞SIRT1和类固醇激素合成关键酶(StAR、CYP19、CYP17)的mRNA水平。采用Western blot检测颗粒细胞SIRT1、类固醇激素合成关键酶蛋白和凋亡相关蛋白(Bcl-2、Caspase-3)的水平。TUNEL法检测颗粒细胞的凋亡率。化学发光法检测颗粒细胞培养液中雌二醇水平。结果 POR组颗粒细胞SIRT1 mRNA和蛋白水平低于NOR组(P=0.003,P <0.001)。RESV上调SIRT1 mRNA和蛋白水平(P <0.001),上调类固醇激素合成关键酶mRNA和蛋白水平(P <0.05),EX527下调SIRT1 mRNA和蛋白水平(P=0.023、0.001),下调类固醇激素合成关键酶mRNA和蛋白水平(P <0.05)。RESV作用颗粒细胞后,细胞凋亡率降低(P=0.000),Bcl-2蛋白水平上升(P <0.001),Caspase-3蛋白水平下降(P <0.001);EX527作用颗粒细胞后,细胞凋亡率升高(P <0.001),Bcl-2蛋白水平下降(P=0.003),Caspase-3蛋白水平上升(P <0.001)。结论 POR女性颗粒细胞SIRT1水平低于NOR女性。RESV增加SIRT1表达。SIRT1抑制颗粒细胞凋亡,提高类固醇激素合成关键酶水平,促进颗粒细胞合成雌二醇。因此,SIRT1激活剂如RESV可能成为改善POR女性卵巢反应性,增加获卵数的治疗药物。