DACT3激活BMP4/Smad信号通路促进胶质瘤细胞铁死亡

作者：郑立; 邓枚; 王利亚; 张继勤; 岳建和; 韩国强; 彭硕; 刘健; 尹浩^*; 谭赢^*

来源：陆军军医大学学报, 2023, 45(13): 1397-1404.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202211125

• DACT3
• 胶质瘤
• 铁死亡
• BMP4/SMAD信号通路

目的 探究基因DACT3促进神经胶质瘤细胞(U251、U118)铁死亡的分子机制。方法 培养人U251、U118胶质瘤细胞，慢病毒转染构建稳定过表达DACT3的细胞后，qRT-PCR和Western blot检测转染效率。上述细胞分成3组：Ctrl组(对照组)、DACT3组(过表达DACT3细胞组)和DACT3+ferrostatin-1组(过表达DACT3+铁死亡抑制剂)。采用CCK-8检测细胞生存率，铁离子、MDA、谷胱甘肽(glutatione, GSH)检测试剂盒测定细胞铁离子、MDA、GSH含量，Western blot检测GPX4、SLC7A11、TFR1表达。进一步将上述细胞分为以下3组：Ctrl组(对照组)、DACT3组(过表达DACT3细胞组)和DACT3+siBMP4组(过表达DACT3+敲低BMP4组),再次利用CCK-8检测细胞生存率，铁离子、MDA、GSH检测试剂盒测定细胞铁离子、MDA、GSH含量，Western blot检测GPX4、SLC7A11、TFR1、BMP4、p-Smad表达。结果 DACT3组中DACT3 mRNA和蛋白表达均显著高于Ctrl组；与Ctrl组比较，DACT3组细胞生存率明显下降，铁离子、MDA含量显著升高，GSH含量明显下降，GPX4、SLC7A11表达显著下降，TFR1、p-Smad、BMP4表达明显升高，差异均具有统计学意义(P<0.05);DACT3+ferrostatin-1组、DACT3+siBMP4组均能一定程度抵消DACT3导致的上述指标的变化，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 DACT3可以促进U251、U118胶质瘤细胞铁死亡，其机制与BMP4/SMAD信号通路激活有关。

• 单位
  贵州省人民医院; 遵义医科大学