内耳支持细胞促进羊水干细胞定向分化为神经元的可能调控机制研究

作者：宗凌; 姜鸿彦^*

来源：中华耳科学杂志, 2022, 20(03): 422-426.

DOI：10.3969/j.issn.1672-2922.2022.03.010

• 羊水干细胞
• 饲养层
• 内耳支持细胞
• 神经元分化
• P27kip1

目的 小鼠内耳支持细胞能诱导羊水干细胞(amniotic fluid stem cells,AFS)定向分化为功能性神经元，但其可能的调控机制仍未明确。本研究从AFS接种密度、内耳支持细胞来源及细胞周期蛋白激酶抑制因子P27kip1表达差异入手，研究上述因素与AFS神经元定向分化的关系。方法 分别将不同密度AFS(2×105、4×105、6×105、8×105、10×105)，接种在内耳支持细胞饲养层表面，观察不同密度对神经元分化突起数量和长度的影响；将AFS分别接种于基底膜和前庭组织来源的饲养层表面，比较内耳支持细胞P27kip1表达差异及其对神经元分化的影响。结果 AFS以高密度(10×105)接种于饲养层能产生更多形态典型的神经元(20倍镜视野下，平均208±25.7条神经突起)，相对于低密度(2×105)接种(20倍镜视野下，平均41±12.3条神经突起)存在统计学差异(P<0.01)；随着接种细胞数的增加，神经突起的数量急剧增多，而神经突起的长度基本保持不变(平均长度88±7.8μm)(P>0.05)。前庭来源饲养层促分化能力较基底膜强，两种饲养层细胞均表达内耳支持细胞标记物P27kip1，前庭P27kip1表达量(79.8±8.0%)明显高于基底膜(46.9±9.7%)(P<0.01)；内耳支持细胞饲养层P27kip1表达量与分化所得的神经突起的数量和长度呈正相关。结论 AFS接种密度以及内耳支持细胞P27kip1表达水平可能共同参与调控AFS向神经元的定向分化。

• 单位
  海南省人民医院; 广州医科大学附属第二医院