本文针对氨基糖苷类化合物结构特性,提出了一种新型、快速、准确、专一的痕量检测方法。这种方法先使用30%三氯乙酸提取牛奶样品,再通过分子印迹固相萃取并净化检测牛奶中6种氨基糖苷类物质,之后利用基质匹配标准曲线定量,经高效液相色谱-串联质谱联用仪分离并检测(MRM模式进行质谱分析、ESI正离子模式扫描)。并选用不同分子印迹填料的固相萃取柱对乳样品的检测效果进行了验证。实验结果表明,该方法能有效地降低基体效应,检测的牛奶中6种氨基糖苷类抗生素的检出限为10~35μg/L。