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摘要
制备OVA12蛋白和OVA12单抗,探讨其在临床肿瘤辅助诊断中的应用前景。将重组质粒pET32a-OVA12转化至BL21(DE3)中,经诱导表达、亲和层析纯化和超滤获得纯化了OVA12蛋白;应用杂交瘤技术制备并通过亲和层析技术纯化得到OVA12单抗;合成OVA12抗原多肽片段,分析单抗识别的抗原表位;建立ELISA法,用纯化的OVA12蛋白及其抗原多肽分析肿瘤患者血清中抗OVA12抗体的含量;用单抗经免疫组化法检测临床不同类型肿瘤组织中OVA12蛋白的表达差异。结果显示,获得了纯化的OVA12蛋白和两株OVA12单抗;检测得知,肿瘤患者血清中的抗OVA12抗体水平显著高于健康人血清;OVA12蛋白在肿瘤组织中的表达也高于癌旁组织及正常组织,提示OVA12蛋白和抗OVA12抗体可作为一个新的肿瘤标志物应用于临床肿瘤的辅助诊断。
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单位上海交通大学; 上海市免疫学研究所
