1型糖尿病患者外周血IL-35表达及其对Th9细胞的调控作用

作者：陈玉凤^*; 赵建林; 周艳红

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2023, 43(01).

• 1型糖尿病
• IL-35
• Th9细胞
• 免疫调控

目的观察1型糖尿病(type 1 diabetes mellitus, T1DM)患者外周血IL-35的表达及其对Th9细胞的调控作用。方法入组31例T1DM患者和13例对照者, 分离血浆和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)。ELISA检测血浆IL-35和IL-9水平, 实时定量PCR法检测PBMCs中IL-35亚基EBI3和IL-12p35亚基以及Th9转录因子PU.1 mRNA相对表达量, 流式细胞术检测PBMCs中Th9细胞比例。使用重组人IL-35刺激T1DM患者和对照者PBMCs, CCK-8法检测细胞增殖, 并检测Th9细胞比例、PU.1 mRNA相对表达量、IL-9分泌水平的变化。分选11例T1DM患者PBMCs中的CD4+CCR4-CCR6-CXCR3-细胞和CD8+T细胞, 使用重组人IL-35刺激CD4+CCR4-CCR6-CXCR3-细胞, 将104个CD4+CCR4-CCR6-CXCR3-细胞与105个CD8+T细胞共培养, ELISA法检测培养上清中IFN-γ和TNF-α水平, 酶联免疫斑点试验检测CD8+T细胞分泌穿孔素和颗粒酶B水平。组间比较采用t检验、配对t检验或LSD-t检验。结果 T1DM患者血浆IL-35水平低于对照组[(67.13±9.94)pg/mlvs (97.77±23.61)pg/ml, P<0.000 1]。T1DM患者PBMCs中EBI3和IL-12p35 mRNA相对表达量低于对照组(P<0.000 1)。T1DM患者外周血Th9细胞比例高于对照组[(3.47±0.99)%vs (2.76±0.75)%, P=0.029], PU.1 mRNA相对表达量高于对照组(P<0.000 1), 血浆IL-9水平亦高于对照组[(99.08±11.85)pg/mlvs (86.38±12.72)pg/ml, P=0.002 8]。IL-35对T1DM患者和对照组PBMCs的增殖水平无显著影响(P>0.05)。IL-35刺激后, T1DM患者Th9细胞比例和PU.1 mRNA相对表达量降低(P<0.01), 但对照组Th9细胞比例和PU.1 mRNA相对表达量无显著性变化(P>0.05)。IL-35刺激后, T1DM患者和对照组PBMCs分泌IL-9水平均显著降低(P<0.01)。CD4+CCR4-CCR6-CXCR3-细胞促进T1DM患者CD8+T细胞分泌IFN-γ、TNF-α、穿孔素和颗粒酶B(P<0.05), 但IL-35刺激CD4+CCR4-CCR6-CXCR3-细胞后, 其诱导的CD8+T细胞分泌IFN-γ、TNF-α、穿孔素和颗粒酶B的能力降低(P<0.05)。结论 T1DM患者中IL-35表达降低, 无法有效发挥免疫抑制活性, 导致Th9细胞活性增强, 造成T1DM免疫炎症损伤。

• 单位
  新乡市中心医院; 新乡医学院