阿仑膦酸钠在地塞米松诱导C2C12细胞自噬中的作用机制探讨

作者：田爱现; 马剑雄; 马信龙^*; 李岩

来源：天津医药, 2021, 49(09): 921-925.

• 二膦酸盐类
• 地塞米松
• 自噬
• Beclin-1蛋白
• 阿仑膦酸钠
• C2C12细胞
• 信号通路

目的探讨阿仑膦酸钠(ALN)在地塞米松(Dexa)诱导C2C12细胞自噬中的作用及机制。方法以C2C12细胞为研究对象,设对照组(DMSO处理),Dexa组(100μmol/L Dexa处理),Dexa+ALN组(100μmol/L Dexa+1.0μmol/LALN处理)。分别以0、0.1、0.5、1.0μmol/L ALN处理C2C12细胞48 h后,采用CCK-8法检测C2C12细胞增殖水平,筛选ALN合适剂量;HE染色法检测C2C12细胞分化;采用Image J统计肌小管直径和融合指数;Western blot检测C2C12细胞肌蛋白肌球蛋白重链(MHC)、肌肉特异性环指蛋白1(Mu RF1)和自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1的表达变化;免疫荧光标记检测C2C12细胞MHC表达水平。结果选取ALN合适剂量1.0μmol/L进行后续实验。HE染色和Image J结果显示ALN剂量为1.0μmol/L时,肌小管直径和融合指数显著增加(P<0.01)。Westernblot结果显示,与对照组相比,Dexa组细胞Mu RF1蛋白表达水平升高;而与Dexa组相比,Dexa+ALN组Mu RF1蛋白表达水平显著下调,自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达增多(P<0.01)。免疫荧光结果显示,与对照组相比,Dexa组MHC蛋白荧光表达强度(红光)明显降低;与Dexa组相比,Dexa+ALN组MHC蛋白荧光表达强度表达显著升高。结论1.0μmol/L ALN能有效促进C2C12细胞增殖分化,改善Dexa对C2C12细胞分化的抑制作用,抑制肌降解蛋白MuRF1表达,其机制可能与适度激活自噬信号通路有关。

• 单位
  天津大学; 天津市天津医院