摘要
目的 在子痫前期(PE)患者胎盘组织中探究葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)的表达及其可能的调控机制。方法 RT-PCR与Western blot法检测PE患者(PE组)和健康妊娠女性(对照组)的胎盘组织中GLUT3与缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的mRNA和蛋白表达差异;分别使用1%、5%与20%浓度的氧进行干预人绒毛膜滋养细胞HTR8/SVneo,Westernblot法检测上述不同浓度氧干预下的细胞中GLUT3与HIF-1α表达;将沉默HIF-1α的siRNA(si-HIF-1α)和阴性对照序列(si-NC)转染入细胞中,并采用1%、5%和20%浓度的氧进行干预转染后的细胞,Western blot检测不同氧浓度下细胞中GLUT3蛋白的表达;将携带缺氧反应元件HRE野生型(HRE-WT)和突变型(HRE-MUT)的Pmir-REPORTTM荧光素酶载体质粒与si-HIF-1α、si-NC共转染入细胞中,荧光素酶基因报告实验检测1%和20%浓度氧干预下的细胞中荧光素酶活性。结果 与对照组相比,PE组胎盘组织中GLUT3与HIF-1α的mRNA和蛋白表达均明显升高;与20%浓度的氧相比,5%与1%浓度的氧处理的HTR8/SVneo细胞中HIF-1α与GLUT3的蛋白表达均明显降低;与5%或1%氧浓度干预的si-NC组相比,si-HIF-1α组中滋养细胞中GLUT3蛋白在20%、5%和1%浓度氧处理下的表达均明显降低;与20%浓度氧条件下的HRE-WT+si-NC组相比,1%浓度氧条件下的HRE-WT+si-NC组细胞中荧光素酶强度明显降低,而20%与1%浓度氧条件下的HRE-WT+si-HIF-1α组、HRE-MUT+si-NC组和HRE-MUT+si-HIF-1α组细胞中荧光素酶活性均无明显改变。结论 GLUT3在PE胎盘组织的表达明显升高,这可能与低氧环境能通过HIF-1α在转录水平上促进滋养细胞中GLUT3的表达有关。
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