人源类溶菌酶蛋白6在男性生殖系统中的表达

作者：黄鹏; 李文姝; 杨智昉; 徐一新; 鲍建瑛; 曹晓娥; 周培华; 李堃; 余龙

来源：中华男科学杂志, 2016, 22(07): 584-590.

DOI：10.13263/j.cnki.nja.2016.07.002

• 人源类溶菌酶蛋白6
• 毕赤酵母
• 真核表达
• 杀菌活性
• 多克隆抗体
• 睾丸
• 精子

目的:检测人源类溶菌酶蛋白6(LYZL6)在男性生殖系统中的表达情况,以揭示其可能的生理功能。方法:将整合LYZL6编码基因的毕赤酵母菌株进行高密度培养,甲醇诱导表达后甲壳素亲和色谱纯化。采用双层琼脂平板扩散法观察重组LYZL6的杀菌活性。以纯化的重组蛋白为免疫原制备兔抗LYZL6多克隆抗体,ELISA检测抗体效价。通过Western印迹检测LYZL6蛋白在人各组织及精液中的分布,并采用免疫组化法确认LYZL6在人睾丸中的表达情况。结果:在低p H条件下重组LYZL6对溶壁微球菌杀菌活性较高。以重组LYZL6为免疫原制备的抗体具有高效价,Western印迹检测表明LYZL6仅在睾丸和附睾中表达,且睾丸表达水平较高。在人精子蛋白提取物中检测到了LYZL6,精浆中并未检测到明显蛋白条带。免疫组化检测显示在睾丸组织中,LYZL6定位于晚期精母细胞及圆形精子细胞。结论:在低p H条件下,重组LYZL6具有较强的溶解细菌细胞壁的能力;LYZL6被睾丸上皮分泌后结合于精子上,提示LYZL6有可能在精卵融合过程的某个环节发挥作用。

• 单位
  遗传工程国家重点实验室; 上海健康医学院; 复旦大学; 上海纽约大学; 基础医学院