C57BL/6J×129/J杂交小鼠ES细胞系的建株

作者：张嘉晴; 余伟华; 张秀明; 彭延文; 李伟强; 陈蕊; 余新炳; 李树浓; 项鹏

来源：中国病理生理杂志, 2006, 22(1): 7-11.

DOI：10.3321/j.issn:1000-4718.2006.01.002

• 小鼠
• 胚胎干细胞
• 杂交

目的:建立C57BL/6J×129/J杂交小鼠ES细胞系.方法:收集3.5 d.p.c.的囊胚,培养在预先铺有小鼠成纤维细胞(MEFs)的高糖DMEM培养液中.3-4 d后,挑出内细胞团(ICM),消化后重新种到新鲜的有MEFS培养液中.等到有典型的ES样集落长出,即传代以得到永久ES细胞系.通过分析碱性磷酸酶活性,SSEA-1,Oct-4的表达和形成畸胎瘤的能力来鉴定ES细胞的多向分化能力.结果:获得的两个C57BL/6J×129/J杂交小鼠ES细胞系绝大多数细胞具有正常的核型(40,XY),碱性磷酸酶染色阳性,SSEA-1,Oct-4表达阳性,ES细胞注入SCID鼠后可获得来自3个胚层的组织.结论:建立了两株具有长期自我更新能力和多向分化潜能的C57BL/6J×129/J杂交小鼠ES细胞系.

• 单位
  中山大学