BDNF的酵母双杂交诱饵载体的构建和初步鉴定

作者：罗星; 何玲; 张峪涵; 孔雪; 于娜; 徐坚; 杨磊; 黄瑾

来源：农垦医学, 2005, (05): 329-331.

• BDNF
• 酵母双杂交
• 诱饵质粒 BDNF
• yeast two-hybrid
• bait piasmids

目的：构建和转化脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究BDNF的功能及作用机制奠定基础。方法：用PCR扩增BDNF基因cDNA中编码完整开放阅读框的基因片段；将该基因片段与plexA载体定向重组；用酶切和测序鉴定重组质粒；将核苷酸序列正确的重组质粒转化人EGY48(p8op-LacZ)酵母菌株。结果：成功构建pLexA-BDNF重组质粒。转化有重组质粒和pLexA空载体的两种EGY48(p8Op—LacZ)酵母都能在SD／Gal／Raf／-His／-Ura培养基中长成白色菌落(同时,转化pLe...

• 单位
  复旦大学; 遗传工程国家重点实验室; 石河子大学