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摘要
目的 探讨尪痹片（WBT）对肾虚证胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠核转录因子-κB受体活化因子（RANK）/RANK配体（RANKL）/骨保护素（OPG）信号通路的影响，探索WBT干预破骨细胞（OC）分化、增殖及骨吸收作用的机制。方法 选用雌性SD大鼠，共48只，随机分为空白对照组、CIA组、肾虚证组、肾虚证CIA组、CIA+WBT组、肾虚证+WBT组、肾虚证CIA+WBT组、CIA+甲氨蝶呤（MTX）组，每组6只。采用去势法制备肾虚证模型，牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂诱导制备CIA模型。模型制备成功后进行药物灌胃，灌胃周期结束后处死，取血及后肢踝关节。甲苯胺蓝染色检测踝关节骨吸收情况。酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清中白细胞介素4(IL-4)、IL-33、OPG、RANKL水平。实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测大鼠踝关节骨组织中RANKL、OPG mRNA表达。蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测大鼠踝关节骨组织中活化T细胞核因子1(NFATc1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)表达。结果 大鼠踝关节软骨甲苯胺蓝染色结果显示，经WBT干预后，关节软骨面结构破坏有所改善，关节软骨面相对完整。与空白对照组比较，CIA组、肾虚证CIA组大鼠血清中IL-4、IL-33浓度降低，RANKL浓度、RANKL/OPG比值及NFATc1、TRAF6蛋白表达升高（P<0.05,P<0.01），肾虚证CIA组OPG浓度、mRNA表达降低（P<0.05,P<0.01）,RANKL mRNA表达升高，RANKL/OPG比值升高（P<0.01）。与肾虚证CIA组比较，肾虚证CIA+WBT组IL-4浓度升高（P<0.01）,RANKL mRNA表达、RANKL/OPG比值及NFATc1、TRAF6蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）。与CIA组比较，CIA+WBT组IL-33、OPG浓度升高（P<0.05,P<0.01）,RANKL/OPG比值降低（P<0.01）。结论 尪痹片能够通过调控RANK/RANKL/OPG信号通路，上调抗破骨因子IL-4、IL-33浓度，抑制炎症反应，直接或间接抑制OC分化、增殖及骨吸收功能。
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