非洲猪瘟病毒抗体ELISA检测方法的建立及初步评价

作者：郝丽影; 孙杰; 王同燕; 王彦伟; 王磊磊; 周倩; 谭菲菲; 逄文强^*; 邓均华^*; 田克恭^*

来源：动物医学进展, 2023, 44(04): 30-35.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2023.04.007

• 非洲猪瘟病毒
• 抗体检测
• p30蛋白
• p72蛋白
• pA104R蛋白
• 间接酶联免疫吸附试验

为建立非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体检测方法，分别用ASFV重组蛋白p30、p72、pA104R作为包被原建立间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法，并进行初步评价。结果显示，ASFV重组蛋白p30、p72及pA104R分别按照25 ng/孔、50 ng/孔、50 ng/孔包被，血清样品均100倍稀释，辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗猪IgG均20 000倍稀释作为酶标试剂条件最优。p30-ELISA、p72-ELISA、pA104R-ELISA临界值分别为0.502、0.567、0.550。样品检测S/P值≥临界值判为阳性，否则判为阴性。3种方法分别检测梯度稀释的ASFV阳性血清、ASFV(CD2v缺失)阳性血清，p72-ELISA灵敏度最高，为1∶64、1∶128;3种方法检测猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒、猪流行性腹泻病毒阳性血清各5份，ASFV阴性血清200份，结果均为阴性；3种方法批间、批内重复性变异系数均小于10%。说明建立的方法均可用于ASFV的血清学检测，为非洲猪瘟的防控提供了多样化的检测方法。

• 单位
  普莱柯生物工程股份有限公司