Caspase-3抑制剂抑制长春碱诱导的人乳腺癌细胞凋亡及IκΒ-α降解

作者：方勇; 吴金民; 潘宏铭

来源：中国病理生理杂志, 2009, 25(02): 215-219.

DOI：10.3321/j.issn:1000-4718.2009.02.002

• 长春碱
• 细胞凋亡
• NF-κΒ/IκΒ信号转导通路
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

目的:本实验通过阻断caspase-3途径,观察长春碱诱导的肿瘤细胞凋亡及胞浆内IκΒ-α蛋白降解的影响,以探索长春碱诱导肿瘤细胞凋亡的信号转导途径。方法:用二甲基亚砜对照、100μmol/L caspase-3抑制剂(DEVD-CHO)预处理乳腺癌Bcap37细胞3h后,加入不同浓度的长春碱,以MTT法检测肿瘤细胞增殖能力,以细胞DNA片段分析及PI染色法检测肿瘤细胞凋亡,以蛋白免疫印迹法检测pro-caspase-3和IκΒ-α蛋白的变化。结果:蛋白免疫印迹法证实长春碱可诱导pro-caspase-3蛋白的降解。经MTT法、DNA凋亡梯状条带法及流式细胞仪PI染色法证实,DEVD-CHO能减弱由长春碱所诱导的肿瘤细胞凋亡。两组的IC50分别为56.8μmol/L和87.4μmol/L。蛋白免疫印迹实验表明,DEVD-CHO能抑制由长春碱所诱导的IκΒ-α蛋白磷酸化降解。结论:在长春碱诱导肿瘤细胞凋亡过程中,NF-κΒ/IκΒ信号转导途径起着重要作用,caspase-3途径参与调节。阻断该途径将减弱长春碱所诱导的肿瘤细胞凋亡和IκΒ-α磷酸化降解。

• 单位
  浙江大学医学院附属邵逸夫医院; 临床医学研究所