摘要
目的 观察壮医药线点灸对偏头痛模型大鼠脑组织miR-34a-5p/SIRT1通路的影响,探讨其治疗偏头痛的作用机制。方法 40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、点灸组、点灸+EX-527组、点灸+生理盐水组,每组8只。皮下注射硝酸甘油制备偏头痛大鼠模型,点灸组、点灸+EX-527组和点灸+生理盐水组予壮医药线点灸“脐环穴”(3穴、6穴、9穴、12穴)、“合谷”(双)、“太冲”(双)干预,点灸+EX-527组腹腔注射EX-527(5 mg/kg),点灸+生理盐水组腹腔注射生理盐水(5 mg/kg),空白对照组和模型对照组仅固定,不干预,每日1次,共14次。对大鼠进行行为学评分,ELISA测定血清降钙素基因相关肽(CGRP)、核因子(NF)-κB、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,qPCR检测中脑组织miR-34a-5p、沉默信息调节因子(SIRT)1、NF-κB p65 mRNA表达,Western blot检测中脑组织SIRT1、Ac-NF-κB p65、NF-κB p65、TNF-α蛋白表达,HE染色、TUNEL染色分别观察中脑组织神经细胞形态和细胞凋亡情况。结果 与空白对照组比较,模型对照组大鼠行为学评分升高(P<0.01),血清CGRP、NF-κB、TNF-α含量增加(P<0.01),中脑组织miR-34a-5p、NF-κB p65 mRNA表达升高(P<0.01),SIRT1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01),NF-κB p65、Ac-NF-κB p65和TNF-α蛋白表达升高(P<0.01);与模型对照组比较,点灸组大鼠行为学评分降低(P<0.05),血清CGRP、NF-κB、TNF-α含量减少(P<0.05),中脑组织miR-34a-5p、NF-κB p65 mRNA表达降低(P<0.05),SIRT1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),NF-κB p65、Ac-NF-κB p65和TNF-α蛋白表达降低(P<0.05);与点灸组比较,点灸+EX-527组大鼠行为学评分升高(P<0.05),血清CGRP、NF-κB、TNF-α含量增加(P<0.05),中脑组织miR-34a-5p、NF-κB p65 mRNA表达升高(P<0.05),SIRT1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),NF-κB p65、Ac-NF-κB p65和TNF-α蛋白表达升高(P<0.05)。各组大鼠中脑组织形态未见异常,无明显细胞凋亡。结论 壮医药线点灸可抑制偏头痛模型大鼠中脑组织miR-34a-5p表达,促进SIRT1表达,使NF-κB p65去乙酰化,降低血清CGRP、NF-κB、TNF-α含量,从而调控炎症反应,发挥治疗偏头痛作用。
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单位广西中医药大学; 广西中医药大学第一附属医院