摘要
目的利用细胞共培养系统研究转基因诱导表达的分泌型人骨形成蛋白2(hBMP-2),对NIH3T3细胞超微结构和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法用阳离子聚合物转染试剂将hBMP-2真核表达载体pcDNA3·1-B2导入NIH3T3细胞,G418筛选获得阳性细胞克隆。免疫组化和酶联免疫吸附试验检测BMP-2胞内和胞外的表达,并利用细胞共培养系统Transwell,将转基因细胞与NIH3T3细胞共培养。结果转染hBMP-2基因的NIH3T3细胞胞内和胞外都有BMP-2的表达。与转基因细胞共培养的NIH3T3细胞在共培养后超微结构的变化和ALP的高表达,都提示其向成骨样细胞分化的趋势。结论经转基因诱导表达的分泌型BMP-2具有诱导成纤维细胞向成骨样细胞分化的作用。
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