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摘要
目的通过改善虾类包被抗原质量,提高血清特异性IgE(sIgE)检测的敏感性。方法制备中华对虾蛋白溶液,经酶联免疫印迹实验鉴定主要的致敏蛋白组分,葡聚糖凝胶层析法初步分离大于55 ku的蛋白组分,SDS-PAGE技术分析其蛋白。分别使用虾蛋白溶液和分离的蛋白作为包被抗原包被96微孔板,采用酶斑点印迹和间接酶联免疫吸附法(间接ELISA法)初步评价纯化后的抗原是否能够提高血清sIgE检测结果的敏感性。结果酶联免疫印迹实验显示中华对虾蛋白溶液中>55 ku的蛋白组分是主要的致敏蛋白,葡聚糖凝胶层析法初步分离了>55 ku的蛋白组分,其中主要包含10条明显蛋白条带;酶斑点印迹显示,以纯化后蛋白作为包被抗原,可提高弱阳性血清斑点光密度。同时,两种包被抗原的间接ELISA结果显示,虾有效致敏成分作为包被抗原时,92.9%的虾过敏患者血清sIgE检测值升高。结论采用中华对虾有效致敏原组分作为虾过敏检测抗原能提高血清sIgE检测结果的敏感性。
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单位天津中医药研究院附属医院; 天津市北辰医院; 天津医科大学
