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摘要
耐热凝结芽孢杆菌因其对营养要求简单、发酵产物浓度高以及耐高温等特点，已成为乳酸发酵的主要菌种。在前期的研究中，我们发现磷酸盐可以激活凝结芽孢杆菌L-乳酸脱氢酶基因的转录，从而提高乳酸产量。然而，磷酸盐如何激活乳酸脱氢酶的基因表达，目前还不清楚，也未有类似的研究报道。【目的】对凝结芽孢杆菌响应磷酸盐的调控机制进行研究。【方法】通过RT-PCR分析磷酸盐添加时凝结芽孢杆菌乳酸脱氢酶转录水平变化，确定响应磷酸盐的关键元件区域，进一步通过分子生物学手段，分析凝结芽孢杆菌响应磷酸盐的关键基因片段。【结果】确定了响应磷酸盐的关键元件位于乳酸脱氢酶基因上游启动子区，解析了响应磷酸盐的L-乳酸脱氢酶启动子核心区，利用该启动子及核心区能够有效驱动外源D-乳酸脱氢酶基因的表达，实现在凝结芽孢杆菌中D-乳酸的合成。【结论】本研究有望获得一种新的响应磷酸盐的调控元件，为提高其他生物化学品的合成效率改造提供参考。
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