摘要
为了探究黑参皂苷的抗肿瘤作用,将生晒参在高温高湿条件下制备成黑参,采用乙醇超声辅助法提取皂苷,并用大孔树脂纯化,液相质谱联用技术(liquid chromatograph-mass spectrometer,LC-MS)测定人参和黑参的皂苷类成分。采用MTT法、流式细胞术、蛋白质印迹法(Western Blot)探讨黑参皂苷对胃癌MGC-803细胞的抑制作用及诱导其凋亡机制。经大孔树脂纯化后黑参皂苷含量为89.02%。LC-MS分析黑参具有14种单体皂苷,其中Rg3、Rg5为稀有皂苷。在对MGC-803细胞活性方面,人参皂苷24 h的IC50为296.64μg/mL,黑参皂苷为141.25μg/m L,且用浓度为200μg/mL的黑参皂苷处理细胞24 h后,其凋亡率为66.96%,线粒体膜电位下降至23.45%,活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平升高至74.65%。Western Blot结果表明黑参皂苷处理组Bax、Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9的表达量均增加,Bcl-2的表达量降低。研究表明,制备的黑参产生了稀有皂苷。黑参皂苷有更强的抗肿瘤活性,细胞凋亡机制是通过Bax、Bcl-2蛋白表达的改变导致线粒体膜电位降低,释放Cyt-C,Caspase-3、Caspase-9被激活而裂解使胃癌MGC-803细胞发生凋亡。
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