日本血吸虫腺苷脱氨酶基因的克隆和融合表达

作者：杨忠; 徐斌; 王玮; 冯正; 魏东芝; 胡薇

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2007, (01): 6-11.

• 日本血吸虫
• 嘌呤代谢
• 腺苷脱氨酶 Schistosoma japonicum
• Purine metabolism
• ADA

目的克隆和表达日本血吸虫(Sj)腺苷脱氨酶(ADA)编码基因,分析该基因的系统发育及预测其编码蛋白的空间结构。方法根据表达序列标签(EST)测序的结果设计引物,PCR法从含有SjADA基因的cDNA克隆中扩增得到该编码基因片段,亚克隆入原核表达载体pET32中表达,表达的融合蛋白用螯合琼脂糖凝胶FF亲和层析纯化。采用MrBayes算法构建系统发育进化树,用自动蛋白注释工具(DS GeneAtlas)软件模拟SjADA的蛋白空间结构。结果获得SjADA基因全长为1 059 bp的编码序列,并克隆、表达和纯化了重组蛋白(SjADA)。生物信息学分析显示,该基因与曼氏血吸虫的同源基因之间的序列一致性...

• 单位
  生物反应器工程国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所; 血吸虫病和丝虫病合作中心; 华东理工大学