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摘要
目的：优化胰腺癌及癌旁组织总RNA的提取方法，为胰腺相关疾病的发病机制研究提供高质量的实验样本。方法：采用组织块分离剪碎、RNase清洗及抑制等方法对胰腺癌及癌旁组织进行预处理，液氮研磨及trizol-氯仿抽提的方法提取组织RNA。通过琼脂糖凝胶电泳及生物分析仪鉴定RNA的完整性。使用等量RNA作为逆转录模板，以oligo dT引物对信使RNA(message RNA, m RNA)进行逆转录；以茎环结构引物对微小RNA(microRNA, mi RNA)进行逆转录。通过定量PCR的方法检测m RNA及mi RNA的表达水平。结果：相较于常规方法，优化方法提取的RNA样品降解程度低，完整性较高。相对于胰腺癌组织，癌旁组织RNA更易降解，m RNA的表达水平出现降低趋势；但mi RNA的表达在胰腺癌及癌旁组织中无明显差异。结论：胰腺癌及癌旁组织的预处理可降低RNA降低程度，可为RNA的表达检测提供高质量的实验样本，增加实验准确度。
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