检测气单胞菌属的SYBR Green荧光PCR方法的建立和评价

作者：杜小莉; 刘九银; 洪颖; 王利; 江良梁; 陈谨; 卢昕; 阚飙; 周海健^*; 崔志刚^*

来源：疾病监测, 2020, 35(05): 425-429.

• 气单胞菌
• 荧光PCR
• 分子检测

目的建立一种检测气单胞菌的SYBR Green荧光PCR方法。方法使用文献报道的气单胞菌属16S rRNA基因扩增引物,建立SYBR Green荧光PCR检测方法,评价其特异性、灵敏度和实际应用价值。结果 SYBR Green荧光PCR方法的检测下限为10–7 ng/ml,检测的21株气单胞菌均为阳性,检测的弧菌、大肠埃希菌、沙门菌、小肠结肠炎耶尔森菌、志贺菌均为阴性。针对104份健康人群粪便样本,8.65%的样本分离到气单胞菌,28.85%的样本SYBR Green荧光PCR方法检测阳性。其中8份标本采用2种方法检测均为阳性。样本核酸检测阳性后再进行病原菌的分离,会漏检1份样本(11.11%),但可以减少71.15%(74/104)的分离培养及鉴定工作。结论 SYBR Green荧光PCR方法具有很好的特异性和敏感度,用于大样本的早期筛查可以减少70%左右的工作量,适合应用于气单胞菌感染和携带的监测。

• 单位
  传染病预防控制国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所; 马鞍山市疾病预防控制中心