白花蛇舌草ISSR反应体系的建立与优化

作者：高慧新; 严炯艺; 王明杰; 田慧^*

来源：江苏农业科学, 2018, 46(23): 72-74.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2018.23.017

• 白花蛇舌草
• ISSR
• 单因素试验
• 正交设计
• 遗传多态性

通过单因素考察结合正交试验的方法,基于反应体系中Taq DNA聚合酶量、DNA模板用量、d NTPs浓度、引物浓度、Mg2+浓度等5因素4水平条件对ISSR反应体系进行优化。白花蛇舌草ISSR-PCR的20μL最佳反应体系为引物浓度0. 562 5μmol/L,Mg2+浓度2. 75 mmol/L,d NTPs浓度0. 375 mmol/L,DNA模板量60 ng,Taq DNA聚合酶1. 25 U,2. 0μL 10×Taq Buffer,其余用dd H2O补齐。该试验建立并优化了白花蛇舌草ISSR-PCR反应体系,为白花蛇舌草种质资源遗传多态性的研究提供参考依据。

• 单位
  广西中医药大学