鼠疫菌caf1基因特异性片段的克隆表达及其抗原与抗体反应

作者：杜春红; 王鹏; TiffanyCHo; 张建中; 宋志忠; 董兴齐

来源：中国媒介生物学及控制杂志, 2012, (06): 489-491+495.

• 鼠疫
• F1抗原
• 特异性片段
• 克隆表达 Yersinia pestis
• F1 antigen
• Specific fragment
• Clone expression

目的克隆表达鼠疫菌caf1基因上的特异性片段并检测。方法分别选取F1上C端(caf1-C)及N端(caf1-N)两段B细胞表位进行克隆表达;PCR扩增目的基因,并与表达质粒pET32a(+)进行连接,重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)并诱导表达;表达产物经NiNTA亲和层析柱纯化,并以Westernblot法检测其抗原与抗体反应。结果分别诱导表达出大小为26000的Caf1-C和25000的Caf1-N两个片段,2个重组蛋白均以可溶形式存在,并与鼠疫免疫血清有良好的反应。结论克隆表达出具有抗原与抗体反应的鼠疫菌F1抗原上的两段B细胞表位,为鉴定是否是F1位点交叉奠定了基础。

• 单位
  中国疾病预防控制中心传染病预防控制所; 传染病预防控制国家重点实验室; 云南省地方病防治所