膜活性肽Marmelittin的原核表达及抗肿瘤活性研究

作者：衣同辉^*; 王宏兰; 王洁; 张春晶; 谭佳音; 潘洪明; 刘哲丞

来源：中国临床药理学杂志, 2020, 36(22): 3696-3699.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2020.22.029

• Marmelittin肽
• 泛素蛋白
• 原核表达
• 圆二色光谱
• 宫颈癌

目的将膜活性肽Marmelittin与泛素蛋白Ub融合表达并测定其抗肿瘤活性。方法构建pCold-TF-Ub-Marmelittin质粒并转化到BL21(DE3)菌中进行诱导表达。筛选Marmelittin肽的最佳表达条件后并对Marmelittin肽进行纯化。圆二色光谱测定Marmelittin肽的二级结构, CCK-8实验和流式细胞术分析Marmelittin肽抗肿瘤活性及机制。结果 Marmelittin肽在表达菌为1.20 mmol·L-1异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导培养10 h时表达量最高。圆二色光谱测定Marmelittin肽为α-螺旋结构。CCK-8实验测定Marmelittin肽对宫颈癌细胞株HeLa半数抑制浓度(IC50)为(46.61±1.25)μg·mL-1。流式细胞术检测表明Marmelittin肽通过诱导凋亡方式杀伤Hela细胞。结论用泛素蛋白Ub为促溶标签成功表达了Marmelittin肽并测定了其抗肿瘤活性,为后续抗肿瘤机制及应用研究提供了一定的基础。

• 单位
  齐齐哈尔医学院; 基础医学院