布鲁菌分泌蛋白BspG的亚细胞定位分析

作者：马忠臣; 胡尊楠; 张超; **; 王勇^*; 陈创夫^*

来源：中国动物传染病学报, 2021, 29(01): 64-70.

• 布鲁菌
• BspG分泌蛋白
• 生物信息学分析
• 亚细胞定位

本研究旨在确定布鲁菌分泌蛋白BspG在宿主细胞中的亚细胞定位。通过生物信息学分析预测BspG蛋白序列特征及功能域,构建立体模型;使用常规分子克隆技术以布鲁菌16M株为模板进行目的基因扩增,构建pMD19-T-BspG克隆载体及pDsRed2-C1-BspG重组真核表达载体,真核载体转染HEK293T细胞,RT-PCR检测BspG在细胞中的转录情况,激光共聚焦显微镜下观察荧光蛋白的表达。结果显示:BspG蛋白具有核定位信号(NLS)及核输出信号(NES);成功扩增BspG基因并构建了表达BspG蛋白的重组真核表达载体pDsRed2-C1-BspG;在真核载体转染的HEK293T细胞里,激光共聚焦显微镜下观察到BspG蛋白存在于宿主细胞核及其周围。本研究表明布鲁菌分泌蛋白BspG存在于宿主细胞核及其周围,可能有核-胞穿梭过程,为BspG的功能及分子机制研究奠定了基础。

• 单位
  石河子大学; 动物科技学院