Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗D抗原含量检测方法的建立

作者：徐康维; 朱文慧; 宋彦丽; 英志芳; 王剑锋; 权娅茹; 李长贵^*

来源：微生物学免疫学进展, 2022, 50(02): 17-22.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2022.02.003

• 脊髓灰质炎灭活疫苗
• D抗原
• 酶联免疫吸附试验
• 抗体

目的 建立检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗中D抗原含量的双抗体夹心ELISA方法。方法 采用纯化的D抗原制备鼠单抗和牛多抗，采用微量中和病变和间接ELISA检测抗体的效价与特异性。以牛多抗为包被抗体、小鼠单抗为显示抗体建立夹心ELISA检测D抗原含量的方法，并进行方法学验证。结果 制备了高效价的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型牛多抗和鼠单抗，牛多抗微量中和效价分别为409 600、96 000和128 000,鼠单抗微量中和效价分别为256 000,128 000和256 000,并可与相应型别D抗原特异性结合。采用这些抗体成功建立了夹心ELISA方法，3个型别标准曲线线性良好，R2>0.99。对所建立的方法进行验证，其结果显示，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型加标回收率分别为80.4%～117.7%、90.3%～111.6%、91.9%～111.3%,均在80%～120%范围内；实验内与实验间CV均<10%;并且能够有效区分D抗原与C抗原。采用国内5家企业生产的疫苗进行了适用性验证，结果显示方法适用性良好。结论 成功建立了检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗中D抗原含量的双抗体夹心ELISA方法，该方法具有良好的准确性与精密度，特异性强，并且能够检测不同企业生产的疫苗。

• 单位
  中国食品药品检定研究院