脑源性神经营养因子促进海马神经干细胞的存活、增殖及向神经元分化

作者：李听松; 蒋莉; 陈恒胜; 张晓萍

来源：细胞生物学杂志, 2008, (03): 387-391.

• 神经干细胞
• 海马
• 脑源性神经营养因子
• 增殖
• 分化

探讨脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)对海马神经干细胞(neural progenitor/stem cells,NPCs)的存活、增殖及分化的影响。采用无血清培养基体外分离、纯化、扩增胎鼠海马NPCs。通过细胞形态观察、nestin免疫荧光染色及血清促分化检测NPCs的干细胞特性;采用神经球计数及神经球直径测定观察BDNF对NPCs的促增殖作用,筛选出在适当细胞密度下,促进NPCs增殖的有效浓度;采用Tunel染色及全自动生化分析仪测定细胞培养上清液乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)的含量探讨BDNF对海马NPCs存活的影响;采用抗-β-微管蛋白(tubulin)III(Tuj-1)染色检测NPCs分化成神经元的百分率,同时测定分化神经元突起的长度。分离的海马NPCs表现为nestin免疫染色阳性,具有自我增殖能力、且能分化为神经元和星形胶质细胞;当细胞密度为5×105个/ml时,10～200ng/ml BDNF能显著促进NPCs的增殖,其中40ng/ml BDNF促增殖作用最强,40ng/ml BDNF能显著增大神经球直径;40ng/ml BDNF显著减少NPCs的凋亡率(Tunel+/DAPI+),抑制LDH漏出;40ng/ml BDNF能显著促进NPCs分化为Tuj-1免疫染色阳性神经元,且分化后神经元的突起长度显著大于对照组。上述结果提示:BDNF促进海马NPCs的存活、增殖及向神经元方向分化。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院; 神经内科