摘要

目的 探讨环形交叉轴突导向受体同源物4(Robo4)蛋白对脑缺血再灌注损伤(CIRI)后小胶质细胞M1/M2极化的影响。方法 选取60只SD大鼠,随机分为假手术(Sham)组、大脑中动脉短暂性闭塞/再灌注(t MCAO/R)组、tMCAO/R联合过表达Robo4慢病毒阴性载体(tMCAO/R+Lv-scramble)组、tMCAO/R联合过表达Robo4慢病毒载体(tMCAO/R+Lv-Robo4)组,每组15只。tMCAO/R+Lv-scramble组及tMCAO/R+Lv-Robo4组在复制tMCAO前7 d于脑室内注射慢病毒载体。Longa评分评估神经功能缺损,TTC法检测脑梗死面积,实时荧光定量聚合酶链反应及Western blotting检测大脑组织中Robo4的表达,Western blotting检测M1小胶质细胞标志物(iNOS和CD86)、M2小胶质细胞标志物(Arg-1和CD206)和Notch通路蛋白(Notch-1、Hes1和Hes5)表达。酶联免疫吸附试验检测TNF-α、IL-1β、IL-10和TGF-β水平。结果tMCAO/R组Longa评分较Sham组高(P<0.05),tMCAO/R+Lv-scramble组较t MCAO/R+Lv-Robo4组高(P <0.05)。tMACO/R组Robo4 mRNA和蛋白相对表达量较Sham组低(P <0.05),tMCAO/R+Lv-Robo4组较tMCAO/R+Lv-scramble组高(P <0.05)。tMACO/R组脑梗死面积较Sham组大(P <0.05),tMCAO/R+Lv-Robo4组较tMCAO/R+Lv-scramble组小(P <0.05)。tMACO/R组较Sham组高(P <0.05),tMCAO/R+Lv-Robo4组iNOS、CD86较tMCAO/R+Lv-scramble组低,Arg-1、CD206较tMCAO/R+Lv-scramble组高(P <0.05)。tMACO/R组较Sham组高(P <0.05),tMCAO/R+Lv-Robo4组TNF-α、IL-1β较t MCAO/R+Lvscramble组低,IL-10、TGF-β较t MCAO/R+Lv-scramble组高(P <0.05)。tMACO/R组Notch-1、Hes1和Hes5相对表达量较Sham组高,tMCAO/R+Lv-Robo4组较tMCAO/R+Lv-scramble组低(P<0.05)。结论Robo4可调控CIRI后小胶质细胞极化向M2表型转移,并调控Notch信号通路,缓解CIRI。