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摘要
目的 分析Delta样蛋白1同源物（DLK1）在生长激素（GH）腺瘤中的表达情况及其临床意义。方法本实验时间为2020年10月至2022年6月。肿瘤标本来自2016—2020年于首都医科大学附属北京天坛医院神经外科行手术切除的34例GH腺瘤患者。采用免疫组织化学染色检测肿瘤标本中DLK1、GH表达情况。取对数生长期的大鼠GH3细胞，将其随机分为A组、B组、C组、D组[B组、C组、D组分别加入1、5、20μg/ml抗DLK1抗体，A组加入等体积的二甲基亚砜（DMSO）]，分别于培养0、24、48、72 h后采用细胞增殖实验检测各组细胞活力。取对数生长期的大鼠GH3细胞，将其随机分为E组、F组（F组加入5μg/ml抗DLK1抗体，E组加入等体积的DMSO），分别于培养0、24、48、72 h后采用ELISA检测各组GH3细胞培养上清液中GH水平。取对数生长期的大鼠GH3细胞，将其随机分为G组、H组、I组、J组（H组、I组、J组分别加入1、5、20μg/ml抗DLK1抗体，G组加入等体积的DMSO），采用Western blot法检测各组GH3细胞中磷酸化p70核糖体蛋白S6激酶（p-p70S6K）、磷酸化起始因子4E结合蛋白1(p-4EBP1)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）水平。结果 DLK1主要位于稀疏颗粒型肿瘤标本的细胞核及致密颗粒型肿瘤标本的细胞质，GH主要位于疏松颗粒型、致密颗粒型肿瘤标本的细胞质。Pearson相关分析结果显示，肿瘤标本的DLK1评分与GH评分呈正相关（r=0.550,P<0.001）。根据DLK1评分中位数将肿瘤标本分为高DLK1评分组（≥110分，n=17）和低DLK1评分组（<110分，n=17）。高DLK1评分组患者血清GH及肿瘤标本GH评分、临床表型为致密颗粒型者占比高于低DLK1评分组（P<0.05）。B组培养48、72 h后细胞活力高于A组，C组、D组培养24、48、72 h后细胞活力高于A组（P<0.05）;C组培养48 h后细胞活力高于B组，D组培养24、48、72 h后细胞活力高于B组（P<0.05）;D组培养48、72 h后细胞活力高于C组（P<0.05）。A组、B组、C组、D组培养24、48、72 h后细胞活力分别高于本组培养0 h后，培养48、72 h后细胞活力分别高于本组培养24 h后，培养72 h后细胞活力分别高于本组培养48 h后（P<0.05）。F组培养48、72 h后GH3细胞培养上清液中GH水平低于E组（P<0.05）。E组培养48、72 h后GH3细胞培养上清液中GH水平高于本组培养0 h后，F组培养48、72 h后GH3细胞培养上清液中GH水平低于本组培养0 h后（P<0.05）;E组培养72 h后GH3细胞培养上清液中GH水平高于本组培养24 h后，F组培养72 h后GH3细胞培养上清液中GH水平低于本组培养24 h后（P<0.05）。H组、I组、J组GH3细胞中p-p70S6K水平高于G组，J组GH3细胞中p-p70S6K水平低于H组、I组（P<0.05）;I组、J组GH3细胞中p-4EBP1水平低于G组、H组（P<0.05）;H组、I组、J组GH3细胞中p-mTOR水平高于G组，I组、J组GH3细胞中p-mTOR水平高于H组，J组GH3细胞中p-mTOR水平高于I组（P<0.05）。结论 DLK1主要在致密颗粒型GH腺瘤中表达；DLK1可抑制GH3细胞增殖，增加血清GH水平，其机制可能与DLK1可抑制GH3细胞中p70核糖体蛋白S6激酶、雷帕霉素靶蛋白的磷酸化及促进起始因子4E结合蛋白1的磷酸化有关。
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