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摘要
目的确定昆明小鼠CD3e+ CD4+ T细胞和CD3e+ CD8a+ T细胞两种淋巴细胞的可存放时间。方法无菌收集昆明小鼠抗凝血和脾脏并制备单细胞悬液,经荧光基团标记的抗体对CD3e、CD4、CD8a进行标记、多聚甲醛处理后运用三色标记流式细胞术分点检测4℃避光保存的待检样品的可存放情况,采用最小二乘法拟合最佳回归曲线,计算各时间点上淋巴细胞含量并进行统计学分析,同设多聚甲醛未处理组。结果昆明小鼠脾组织内CD3e+ CD4+ T细胞和CD3e+ CD8a+ T淋巴细胞经多聚甲醛处理后分别在第11天和第16天显著降低,未经多聚甲醛处理样品的这两个亚群细胞则在第8天和第11天显著降低;经多聚甲醛处理的外周血T淋巴细胞的可存放时间较长(均为第18天),高于未处理组(第10天和第15天)。结论流式细胞术检测多聚甲醛处理的昆明小鼠脾组织和外周血T淋巴细胞应在第11天前完成。
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单位中国农业科学院兰州兽医研究所; 黑龙江八一农垦大学; 生命科学技术学院; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室
