NOD2调控Snail表达在糖尿病肾病足细胞上皮-间质转分化中的作用

作者：张亚; 尚进; 王璐瑶; 何倩欣; 窦艳娜; 刘栋; 程根阳; 肖静; 赵占正^*

来源：中华肾脏病杂志, 2018, 34(09): 673-680.

• NOD2信号接头蛋白质
• 细胞转分化
• 足细胞
• 锌指转录因子

目的观察高糖环境中足细胞核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2(NOD2)、上皮-间质转分化(EMT)相关蛋白的表达, 探讨NOD2参与EMT的分子机制。方法常规方法培养人肾小球足细胞, 高糖刺激后细胞免疫荧光法检测EMT相关蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、nephrin的表达;实时荧光定量PCR和Western印迹法检测NOD2、锌指转录因子(Snail)和足细胞EMT相关蛋白α-SMA、结蛋白(Desmin)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)及Nephrin的表达。shRNA干扰NOD2表达后再给予高糖刺激细胞, Western印迹法检测Snail及后续EMT相关蛋白的表达情况。用shRNA干扰Snail表达后, 胞壁酰二肽(MDP)活化NOD2, Western印迹法检测E-cadherin、Nephrin、Desmin、α-SMA的表达。结果高糖刺激24 h后, 与正常对照组相比, 高糖组NOD2、Snail mRNA和蛋白的表达明显增加;上皮表型蛋白E-cadherin、Nephrin mRNA和蛋白的表达下调, 间质表型蛋白Desmin、α-SMA mRNA和蛋白的表达上调(均P<0.05);高渗对照组无明显变化。干扰NOD2表达后, Snail及EMT相关蛋白表达异常均得到恢复, 与高糖组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。与MDP组相比, MDP+shRNA-Snail组细胞E-cadherin、Nephrin蛋白的表达明显增加;Desmin、α-SMA表达明显减少(均P<0.05)。结论高糖可诱导足细胞NOD2表达, 并通过上调Snail表达促进足细胞上皮-间质转分化。以NOD2/Snail/EMT通路为靶点的基因干预可减轻高糖引起的足细胞损伤, 可能为糖尿病肾病的治疗提供新思路。

• 单位
  郑州大学第一附属医院