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摘要
目的 研究酪氨酸激酶受体2(tyrosine kinase receptor 2, Tie2)在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma, OSCC）中的表达情况及其对细胞增殖、迁移及上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）过程的影响。方法 采用免疫组织化学（immunohistochemistry, IHC）检测Tie2在OSCC组织与正常口腔黏膜组织中的表达。Western blot检测DOK细胞及OSCC细胞株中Tie2的表达，选取Tie2高表达细胞株作为实验株。将沉默Tie2的慢病毒载体成功转染至实验株用于后续实验。CCK-8及克隆形成实验检测细胞增殖、克隆能力；细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移能力；激光共聚焦显微镜检测细胞骨架纤丝状肌动蛋白（F-actin）重塑能力及上皮钙黏素（E-cadherin）、神经钙黏素（Ncadherin）的表达；Western blot检测EMT相关标志性蛋白E-cadherin、N-cadherin、波形蛋白（vimentin）的表达以及蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)、胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase, ERK）的表达。结果 IHC结果显示：OSCC组Tie2阳性率（74.5%）高于对照组（19.4%）(P<0.000 1)。与DOK细胞相比，Tie2在HSC-4及SCC-9细胞株呈现高表达，慢病毒shRNA-162组沉默效果最好，作为实验组并应用于后续实验。与对照组相比，实验组细胞的增殖、克隆及迁移能力明显降低，细胞骨架F-actin绿色荧光强度降低，细胞前缘丝状伪足数量减少、长度变短；E-cadherin的表达明显增加，Ncadherin、vimentin的表达明显降低。p-AKT及p-ERK蛋白表达降低，AKT及ERK蛋白的表达增加。结论 Tie2在大多数OSCC中呈高表达，沉默Tie2能通过调控AKT及ERK信号通路抑制OSCC细胞增殖克隆迁移能力，抑制F-actin重塑，改变其EMT相关标志性蛋白的表达，提示Tie2可能参与了OSCC的生长、转移及EMT过程。
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