虎杖苷通过调控HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路对脓毒症急性肺损伤的保护作用

作者：孙鹏; 陈敏; 张细六^*; 许爱军

来源：浙江中医药大学学报, 2021, 45(07): 691-699.

DOI：10.16466/j.issn1005-5509.2021.07.002

• 脓毒症
• 急性肺损伤
• 虎杖苷
• 炎症反应
• SOD
• MDA
• HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路
• 大鼠

[目的]观察虎杖苷(polydatin,PD)对脓毒症急性肺损伤大鼠的保护作用,并探究其作用机制。[方法]将50只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级SD大鼠随机分为假手术组、模型组和PD高、中、低剂量组,每组10只。模型组和PD高、中、低剂量组大鼠采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症急性肺损伤模型,假手术组打开腹腔翻动盲肠后缝合。PD高、中、低剂量组大鼠分别予100、50、25mg·kg-1PD灌胃,假手术组和模型组大鼠予等量0.5%羧甲基纤维素钠(carboxymethyl cellulose sodium,CMC-Na)灌胃,1次/d,连续7d。实验结束检测各组大鼠肺组织湿干重比(wet-to-dry weight ratio,W/D)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肺组织病理变化;酶联免疫吸附检测(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;实时定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Realtime qPCR)法和Western blot法检测肺组织高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)、Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65 mRNA和蛋白表达水平。[结果]与假手术组比较,模型组TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平升高,SOD活力降低,W/D值显著升高(P<0.05);与模型组比较,PD高、中剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平降低,SOD活力升高,W/D值显著降低(P<0.05),而PD低剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平,SOD活力及W/D值差异无统计学意义(P>0.05);PD中剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平和W/D值高于PD高剂量组,低于PD低剂量组,SOD活力低于PD高剂量组,高于PD低剂量组(P<0.05)。HE染色显示,模型组大鼠肺泡壁增厚水肿,有大量炎性细胞浸润;与模型组比较,PD高、中剂量可显著改善大鼠肺损伤,减轻肺泡壁增厚、水肿及炎性细胞浸润。Real-time qPCR和Western blot检测显示,与假手术组比较,模型组HMGB1、TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达均增加(P<0.05);与模型组比较,PD高、中剂量组HMGB1、TLR4、NF-κB p65 m RNA和蛋白表达降低(P<0.05),PD低剂量组HMGB1、TLR4和NF-κB p65 mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与PD高剂量组比较,PD中、低剂量组HMGB1、TLR4和NF-κB p65 mRNA和蛋白表达增高,其中PD中剂量组HMGB1、TLR4和NF-κB p65 mRNA和蛋白表达低于PD低剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]PD对大鼠脓毒症相关急性肺损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的活化有关。

• 单位
  武汉市第九医院; 武汉同济医院; 武汉市第五医院; 湖北工业大学