秦川牛FABP4基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

作者：魏胜娟; 昝林森; 王洪宝; 成功; 季舒涵; 王虹; 付常振; 姜碧杰

来源：中国农业科学, 2013, (07): 1434-1440.

• 秦川牛
• FABP4基因
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• 腺病毒 Qinchuan cattle
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【目的】旨在通过构建秦川牛FABP4基因的重组腺病毒载体,为在细胞水平研究FABP4基因的功能和作用机制做准备。【方法】根据GenBank收录的牛FABP4基因mRNA序列设计引物,PCR扩增并克隆测序。将目的基因连接到穿梭载体pAdTrack-CMV上并用PmeⅠ线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的E.coli BJ5183感受态细胞进行同源重组,得到重组质粒pAd-FABP4,并用PacⅠ酶切鉴定。将经过PacⅠ线性化的pAd-FABP4转染HEK 293A细胞进行病毒包装和扩增,TCID50法测定病毒滴度。【结果】经测序鉴定本次克隆的FABP4序列与GenBank收录的一...

• 单位
  国家肉牛改良中心; 西北农林科技大学