他克林对脂多糖诱导小鼠睾丸支持细胞炎性损伤的保护作用

作者：蔡金霞; 黄明光^*; 胡传活^*; 张鑫; 梁莹莹; 纪伟霞; 冯妮; 葛晨玲; 陈志英; 李珣; 王晓晔

来源：西南农业学报, 2022, 35(03): 700-706.

DOI：10.16213/j.cnki.scjas.2022.3.029

• 他克林
• 脂多糖
• 小鼠睾丸支持细胞
• 炎性损伤

【目的】分析他克林对脂多糖(LPS)诱导小鼠睾丸支持细胞(TM4)炎性损伤的保护作用，从炎症角度探索他克林的功能，为动物生产过程中雄性动物生殖疾病相关抗炎药物的利用及精子质量提升提供更多药物选择。【方法】采用CCK8法检测0.01、0.10、1.00、10.00和100.00μg/mL LPS分别诱导3.0、6.0、12.0和24.0 h对TM4的适宜损伤条件；同时分析0.01、0.10、1.00、10.00、100.00、1000.00、10 000.00和100 000.00μg/mL他克林在加入LPS前预处理0.5、1.0和2.0 h或加入LPS后处理0.5、1.5、3.0、6.0、12.0和24.0 h对TM4炎性损伤的适宜保护条件。以荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测TNF-α和IL-6基因mRNA表达水平，以ELISA法进一步评价细胞上清TNF-α和IL-6蛋白表达量，以免疫蛋白印迹(WB)法分析NF-κB蛋白表达量。【结果】不同浓度不同处理时间下，LPS对TM4增殖的影响情况存在差异，其中1.00μg/mL LPS处理12 h TM4的增殖率极显著低于空白组(P<0.01,下同)。他克林对TM4炎性损伤的保护作用与处理时间和剂量有关，其中，10 000.00μg/mL他克林预处理2.0 h的TM4增殖率显著低于空白组(P<0.05,下同),10 000.00、100 000.00μg/mL他克林预处理0.5和1.0 h或后处理0.5、1.5、3.0、6.0、12.0和24.0 h的TM4增殖率均极显著低于空白组，而0.01μg/mL他克林后处理6.0 h的保护作用最佳，其TM4增殖率显著高于空白组。与空白组相比，LPS可显著上调TM4的IL-6和TNF-α基因mRNA及蛋白表达量，而与LPS组相比，0.01μg/mL他克林显著下调其表达量。与空白组相比，LPS可显著上调TM4的NF-κB蛋白表达量；1.00、100.00和10 000.00μg/mL他克林可极显著上调NF-κB蛋白表达量，而与LPS相比，0.01μg/mL他克林降低NF-κB蛋白表达量，但差异不显著(P>0.05)。【结论】0.01μg/mL他克林后处理6.0 h对TM4的保护作用最佳，其机制可能与IL-6和TNF-α基因mRNA及蛋白表达量下调有关。

• 单位
  广西大学; 广西壮族自治区畜牧研究所