基于凝血酶诱导自噬探讨化瘀解毒法对缺血性中风（瘀毒互结证）大鼠的影响

作者：马若梦; 邓奕辉; 彭珣; 李钰佳; 阳晶晶; 李定祥^*

来源：中医药信息, 2023, 40(01): 30-38.

DOI：10.19656/j.cnki.1002-2406.20230105

• 化瘀解毒法
• 凝血酶
• 自噬
• 缺血性中风

目的：观察化瘀解毒法对缺血性中风瘀毒互结证（IS-YD）大鼠不同缺血时相、不同脑区凝血酶表达以及自噬指标LC3Ⅱ/Ⅰ的影响，分析其发挥抗缺血性脑损伤作用的可能机制。方法：于缺血后12、24 h，将116只SD大鼠，随机分为假手术组（SHAM组）、模型组（IS-YD组）、化瘀解毒方组（HJF组）和阿加曲班组（ARG组），其中假手术组8只，其余每组36只，再分为12、24 h两个时间点，每组18只。除假手术组外，其余大鼠制备缺血性中风瘀毒互结证模型。化瘀解毒方组给予11.33 g/（kg·d）剂量灌胃，阿加曲班组予以11.16 mg/（kg·d）剂量腹腔注射，假手术组、模型组给予0.9%生理盐水灌胃。Western blot法检测大脑皮质、海马区的凝血酶、LC3Ⅱ/Ⅰ比值的表达；TTC染色法计算脑梗死体积；透射电镜观察法观察脑区自噬超微结构；HE染色法观察神经元形态学改变。结果：与假手术组比较，模型组大鼠12、24 h两个时间点的神经功能评分升高（P <0.01），脑梗死体积占比增加（P <0.05），大脑皮质、海马区凝血酶、LC3Ⅱ/Ⅰ比值表达均明显升高（P <0.01），皮质和海马区见自噬小体、自噬溶酶体数量明显增多，皮质区可见大片神经元坏死，细胞核皱缩或碎裂，海马区神经元细胞排列紊乱、细胞核固缩深染；与模型组比较，化瘀解毒方组和阿加曲班组大鼠12、24 h两个时间点的神经功能评分显著降低（P <0.01），脑梗死体积占比显著降低（P <0.05）；化瘀解毒方组和阿加曲班组皮质和海马区的凝血酶、LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著下降（P <0.05,P <0.01），自噬小体、自噬溶酶体数量减少，且病理形态损伤轻微，神经元损伤程度降低。结论：依据化瘀解毒法创立的化瘀解毒方能发挥抗脑缺血作用，可能机制是通过抑制凝血酶的过表达，下调自噬的发生，从而减轻缺血性脑损伤。

• 单位
  湖南中医药大学