纳米磁珠免疫分析技术的建立及其检测人红细胞血型Mia(MNS7)抗体的初步实验

作者：田晶晶; 丁少华; 王红梅; 段生宝; 陈晔洲; 李勇

来源：中国输血杂志, 2014, 27(03): 244-248.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2014.03.006

• 纳米磁珠
• 免疫分析
• Miltenberger血型
• Mia抗原多肽
• 抗体检测

目的制备偶联人红细胞Miltenberger血型抗原多肽的免疫磁珠,以之为基础建立快速便捷的Miltenberger血型抗体检测技术。方法利用水热合成法合成纳米磁珠,在其表面包被二氧化硅层,并进行氨基化修饰;利用碳酰二亚胺盐(EDC)分别将人免疫球蛋白G(IgG)及牛血清白蛋白(BSA)偶联于磁珠表面,优化偶联条件,并通过流式细胞仪检测荧光标记的抗IgG来评价偶联效果;将人红细胞Miltenberger血型Mia(MNS7)抗原多肽偶联于磁珠表面,检测血清中的抗体。结果纳米磁珠平均粒径为400 nm,包被二氧化硅层后可有效提高磁珠分散性,经氨基化修饰氨基含量约260μmol/g;在提高偶联效率同时保证蛋白与磁珠间的非特异吸附最低,确定了0.01 mol/L PB溶液(pH=7.4)为偶联BSA、0.1 mol/L PB溶液(pH=7.4)为偶连人IgG的最适反应溶剂,非特异性吸附最小;经荧光素标记抗人IgG检测,偶联人IgG磁珠的荧光信号值约为偶联BSA磁珠的荧光信号值的100倍;Mia抗原多肽免疫磁珠对阴性、阳性血清检测的荧光信号差别可达10倍。结论成功制备偶联人红细胞Miltenberger血型系统Mia抗原多肽的免疫磁珠,并确定其在检测人血清抗体中的应用价值。

• 单位
  中国科学院; 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所