抗猪输血传播病毒1型Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

作者：张龙; 刘建波; 黄立平; 郭龙军; 危艳武; 唐青海; 吴洪丽; 刘长明

来源：中国预防兽医学报, 2011, (12): 974-978.

• 猪输血传播病毒1型
• 重组Cap蛋白
• 单克隆抗体 porcine transfusion transmitted virus type 1
• recombinant capsid protein
• monoclonal antibody

为制备抗猪输血传播病毒1型(TTV1)Cap蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究采用PCR法扩增TTV1ORF1(1501 nt～2475 nt)编码重组Cap蛋白的C末端截短序列,将PCR产物克隆于pGEX-6P-1载体中,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中诱导表达,获得含GST标签的重组蛋白(rCap),经SDS-PAGE和western blot鉴定表明rCap约为64.0 ku,以包涵体形式存在。用纯化的rCap免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术获得8株稳定分泌抗rCap蛋白的杂交瘤细胞株,MAb亚类均为IgG1/κ型;western blot鉴定表明有7株MAbs与r...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所