改良型TAT-VP3融合蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体的制备

作者：张之甲; 李俊; 詹辉; 王剑松; 颜汝平; 丁明霞; 刘靖宇; 王伟; 李宁

来源：现代泌尿生殖肿瘤杂志, 2012, (02): 90-93.

• 融合蛋白
• 蛋白纯化
• 多克隆抗体 Fusion protein
• Protein purify
• Polyclonal antibody

目的表达、纯化改良型TAT-VP3融合蛋白,并制备其多克隆抗体。方法利用原核表达载体PGEX-6P-1/改良型TAT-VP3在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,经GST标签纯化树脂纯化蛋白,并用PreScission Protease酶切除标签,以纯化的蛋白免疫新西兰大白兔,获得改良型TAT-VP3融合蛋白的多克隆抗体。用ELISA进行效价检测,Western blotting鉴定其特异性。结果诱导表达并纯化了改良型TAT-VP3融合蛋白,纯度大于90%,蛋白浓度为1.2mg/ml。制备了该蛋白的多克隆抗体,ELISA表明多克隆抗体效价为1:32000,Western blotting证...

• 单位
  昆明医科大学第二附属医院; 昆明医科大学