维生素D干预对支气管哮喘幼鼠外周血T淋巴细胞平衡调节及肠道菌群的影响

作者：蔡姿秀; 周国华; 田军^*

来源：中国医药导报, 2023, 20(16): 21-36.

DOI：10.20047/j.issn1673-7210.2023.16.04

• 维生素D
• 支气管哮喘
• 肠道菌群
• 外周血T淋巴细胞平衡
• 调节机制

目的 研究维生素D(VitD)干预对支气管哮喘（以下简称“哮喘”）幼鼠外周血T淋巴细胞平衡调节及肠道菌群的影响。方法 选取30只7 d龄SPF级野生型BALB/c雌性小鼠（体重4.09～6.13 g）为研究对象，采用随机数字表法将其分为哮喘模型组（15只）和VitD干预组（15只），另选取10只为健康对照组。实验第1、7天，哮喘模型组及VitD干预组采用10%卵清蛋白（OVA）致敏液200μl腹腔注射，健康对照组注射等量生理盐水。第18天，VitD干预组给予VitD滴剂[35μg/（kg·周），1次/2 d]灌胃，共给药2周，健康对照组、哮喘模型组灌胃等量磷酸盐缓冲液。第19天，哮喘模型组和VitD干预组给予3%OVA溶液10 ml雾化吸入20 min，健康对照组给予等量生理盐水雾化吸入，1次/d，共6 d。实验结束后，观察三组肺组织切片苏木精-伊红染色结果；采用流式细胞仪检测并计算三组血清Th1/Th2、Th17/调节性T细胞（Treg）比值；通过16S r DNA测序法分析三组粪便内菌群情况。结果 健康对照组肺组织支气管壁及肺泡壁结构完整，肺泡腔内无渗出，肺泡上皮排列有序，肺泡壁厚度正常；哮喘模型组肺泡壁结构受损，肺泡上皮细胞破坏，黏膜充血水肿，血管周围炎症细胞浸润；VitD干预组肺组织炎症反应较轻。三组测序样本微生物物种Shannon指数曲线趋平缓，三组Simpson指数比较，差异无统计学意义（P>0.05）。PCo A图分析显示，哮喘模型组和健康对照组组间距离大，VitD干预组与哮喘模型组组间距离近（P<0.05）。三组肠道菌群涉及15个门，23个属。哮喘模型组Th1/Th2比值及Actinobacteriota、Helicobacter、Colidextribacter丰度低于健康对照组，Th17/Treg比值及Proteobacteria、Ligilactobacillus、Bacteroides丰度高于健康对照组（P<0.05）。VitD干预组Thl/Th2比值及Actinobacteriota、Proteobacteria、Helicobacter、Colidextribacter丰度高于哮喘模型组，Th17/Treg比值及Ligilactobacillus、Bacteroides丰度低于哮喘模型组（P<0.05），与基于属水平的Heatmap分析结果一致。结论 VitD干预可以调节外周血T淋巴细胞的平衡，改变哮喘幼鼠的肠道菌群，可能是该病发病机制的新切入点。

• 单位
  杭州市萧山区第一人民医院; 杭州市萧山区第三人民医院