一种适用于RT-PCR的微藻总RNA提取方法

作者：杨婧; 牛艳; 张可炜; 孔健

来源：海洋科学, 2010, (01): 6-10+47.

• 绿色巴夫藻(Pavlova viridis)
• 多糖
• 多酚
• 总RNA
• 反转录聚合酶链式反应 Pavlova viridis
• polysacchrides
• polyphenols
• RNA extraction
• RT-PCR

以绿色巴夫藻(Pavlova viridis)为实验材料,在比较了Trizol试剂法和异硫氰酸胍一步法这两种常用RNA提取方法的基础上,建立了一种十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)和酸酚相结合的改良的CTAB-酸酚法。此方法利用高浓度的β-巯基乙醇来防止RNA提取过程中多酚的氧化,然后利用CTAB并结合乙醇和醋酸钾同时使用的方法来有效去除多糖类物质对RNA的干扰。经琼脂糖凝胶电泳检测,所提取的总RNA的28S、18S条带清晰明亮,无降解;其A260 nm/A280 nm值为1.968;200~300 nm全波长紫外扫描无多糖和蛋白吸收峰,表明提取的总RNA质量较好。对提取的总RNA直接进行反转录...

• 单位
  微生物技术国家重点实验室; 山东大学