摘要
在葡萄糖氧化酶研发生产过程中,需要对发酵液进行酶活力检测。目前常用的方法有滴定法、电化学法和连续分光光度法,但这些方法均因其独立重复实验误差较大而缺乏实用性。因此建立一种操作简单、快速、重现性好、成本低的检测方法,是葡萄糖氧化酶研发生产中亟待解决的问题。该项研究在生产实践中,开发建立了一种新的葡萄糖氧化酶活性测定方法:碘-淀粉分光光度法。以β-D-葡萄糖为底物,利用葡萄糖氧化酶特异性催化作用,生成中间产物过氧化氢,再通过碘-淀粉分光光度法定量测定过氧化氢含量,进而计算葡萄糖氧化酶活力。结果表明:反应体系在葡萄糖氧化酶浓度为0.1~0.5 U/mL范围时,检测平行性良好,独立重复实验酶活力计算结果相对偏差小于5%,在统计学分析误差范围内。
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单位江苏省海洋生物技术重点实验室