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摘要
背景：间充质干细胞主要通过旁分泌作用改善组织损伤，低氧预处理后其旁分泌作用增强，但关于人华通胶间充质干细胞低氧预处理后的条件上清液对心肌缺血再灌注损伤的作用及其机制仍需深入研究。目的：探讨缺氧预处理人华通胶间充质干细胞条件上清对心肌缺血再灌注损伤H9C2细胞凋亡的影响及机制。方法：常氧、低氧处理人华通胶间充质干细胞，获得条件上清；大鼠H9C2细胞通过缺氧复氧和无血清培养6 h模拟体内心肌缺血再灌注损伤，试剂盒检测H9C2细胞培养上清中乳酸脱氢酶活力。将大鼠H9C2细胞分为4组：常氧培养组、模型组、常氧条件上清组和低氧条件上清组，造模后给予常氧条件上清和低氧条件上清干预24 h后，流式细胞仪检测细胞凋亡率，Western blot检测各组H9C2细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和自噬相关蛋白Beclin-1、p62、LC3的表达。结果与结论：(1)经缺氧复氧无血清处理及加入人华通胶间充质干细胞条件上清后，H9C2细胞形态无明显变化；(2)与常氧培养组相比，模型组H9C2细胞上清液中乳酸脱氢酶活力明显升高，加入两种人华通胶间充质干细胞条件上清后乳酸脱氢酶活力均下降；(3)与模型组相比，常氧条件上清组和低氧条件上清组H9C2细胞凋亡减少，Bax、Beclin-1、LC3蛋白表达降低，p62蛋白表达升高，且低氧条件上清组改变较常氧条件上清组显著；(4)结果表明，缺氧预处理人华通胶间充质干细胞条件上清可减少心肌缺血再灌注损伤导致的H9C2细胞凋亡，且该保护作用可能与其抑制自噬有关。
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单位解放军总医院; 安徽医科大学
